没有必要，最多一个样品一次反应用两个重复的，以防有明显的操作失误。如果两个孔的数据很接近，就取平均值作为一个值来看待。如果2者差别很大，说明有操作失误，这个样本的结果就不能要，需要重做。
实际上染色的当然要比一个视野多很多，才能选取质量好的图像。一般来说，12-13毫米直径的玻片刚好能够放进24孔板，是做免疫荧光常用的大小。这个面积上面种多少细胞，同你的细胞类型及其单个细胞大小有关。做免疫荧光的话，细胞不应该长得太密。我估计你每个样本有几万个细胞就够了。
你如果做三个以后发现高度一致，可以考虑减少到做两个。其实冒这种风险不太划算，因为做两个如果差异太大则这个数据点废弃，可能导致整套数据不完整，损失更大。是否一致同你的移液技术以及反应系统的各种试剂有关。所以每换一对引物要重新检查一致性。
1、避免数据造假。根据查询相关公开信息显示，目标蛋白和内参蛋白在同一张膜上，不能裁膜可以避免上面数据造假的情况发生。wb，英语单词，是WesternBlot的缩写，指蛋白质印迹。
2、工厂里的WB，是指“水漆白度”（White Backing）的缩写。在喷涂行业中，WB是描述水漆涂膜覆盖度、白度以及反光性能的一种参数。在喷涂过程中，工人需要根据要求来控制WB的值，以保证所涂覆面 的涂料质量和外观。
3、WB是指Western Blot，即蛋白质印迹法。它是一种广泛应用于生物学和医学研究中的实验技术，用于检测和分析蛋白质在样本中的表达水平和分布情况。Western Blot基于抗原-抗体特异性结合的原理，通过将蛋白质转移到固相支持物上，并利用特异性抗体进行检测，从而实现对蛋白质的定性和定量分析。
4、相机里的WB就是白平衡，英文意思是white balance，用来校正相机拍摄成品的颜色，当设置的白平衡参数与外界色温相同则白色显示为正常白色。白平衡是描述显示器中红、绿、蓝三基色混合生成后白色精确度的一项指标。白平衡是电视摄像领域一个非常重要的概念，通过它可以解决色彩还原和色调处理的一系列问题。
5、wb不裁剪敷抗体的步骤如下：准备样品：将需要检测的蛋白质样品进行裂解，并加入相应的蛋白质加载缓冲液。SDS-PAGE电泳：将样品加入SDS-PAGE凝胶中进行电泳分离。转膜：将电泳分离后的蛋白质转移到PVDF或者nitrocellulose膜上。阻断：将转膜后的膜在TBST缓冲液中进行阻断，以减少非特异性结合。
wb条带弱可以重新孵二抗。根据查询相关公开信息显示，二抗不显影了，重新孵育二抗。是抗体浓度的问题，调整后会出条带，是蛋白的问题，那重新孵育也没有结果。
该情况需要洗。wb孵二抗，孵错了可以重孵的，用TBST充分洗一下，影响不会太大。如果种属相近有概率会反应，但是也没关系。如果种属不一样，洗掉重新加就好了。wb孵二抗应该孵育1至2小时或在四摄氏度下过夜。
封闭不充分，重新孵育。wb二抗孵育完不显影是因为封闭不充分，导致二抗孵育完不能立即显色，需要在wb检测前选择更加合适的封闭液，并适当延长优化封闭条件时间与温度。
wb一抗孵完不可以先不孵二抗。一抗、二抗为了洗去一抗和二抗的非特异性结合，洗涤的效果直接影响结果背景的深浅，所以洗涤一定要干净。一抗、二抗的浓度一般要参照抗体说明书选择最适当的比例，一抗二抗的选择直接影响实验结果以及背景的深浅。
Western Blot实验中条带未出现的问题分析及解决方法： 抗体失效：- 更换抗体：确保使用新鲜配制的抗体工作液。- 一抗和二抗不匹配：更换为与目标蛋白亚型相匹配的抗体。 发光液失效：- 更换新的发光液：使用有效的发光试剂。
如果wb一抗孵错了，有以下几点补救措施： 降低一抗浓度：如果一抗孵育时间过长或者一抗浓度过高，可以尝试降低一抗的浓度，以减少非特异性条带的出现。 增加洗膜时间和次数：如果一抗孵育时间过短或者一抗浓度过低，可以尝试增加洗膜的时间和次数，以去除未结合的一抗，从而减少背景噪音。
1、总体感觉文章要有创新点，有别人没有发现过的东西，文章数据量的倒不是关键问题，我的第一篇数据量就很大，但也没有用。第一篇后来被JAM接受了，当然还是补了一点实验，补充的实验其实如果再投AEM可能也有戏，但是由于毕业的时间限制，所以不敢再投了。
2、审稿过程复杂：AEM是一个高水平的学术期刊，其审稿过程非常严格和复杂。在审稿过程中，编辑需要对论文进行同行评议，这通常需要多个审稿人的意见和评估。如果审稿过程需要更长时间来完成，那么投稿状态可能会一直显示为under consideration。
3、经济学核心期刊会要求投稿人提供原始数据吗 一般不要求提供原始数据。
4、一般不需要的，文章通过检测没有抄袭，有一定的学术价值都可以发表的。不过级别高的刊物审稿和要求都比较严，要看发什么样的刊物。不妨向公务员之家网站了解一下。期刊，定期出版的刊物。如周刊、旬刊、半月刊、月刊、季刊、半年刊、年刊等。由依法设立的期刊出版单位出版刊物。
5、ScienceAdvance没有规定在投稿时必须上传数据集。ScienceAdvance是一种开放获取的科学期刊，并没有规定在投稿时必须上传数据集。但是，这个期刊鼓励作者在发表论文的同时提供原始数据或代码等相关材料，以便读者复制或验证这个研究的结果。
1、质谱技术MS：是目前分析蛋白质的主要手段之一。质谱技术可以检测蛋白质的质量、序列、修饰和定量等信息，包括基于母离子扫描MS和tandem MS（MS/MS）等多种方法。两维凝胶电泳技术2D-PAGE：是一种基于分子量和等电点对蛋白质进行分离的技术。
2、转录组学研究的是某个时间点的mRNA总和，可以用芯片，也可以用测序。芯片是用已知的基因探针，测序则有可能发现新的mRNA，蛋白组学针对的是全体蛋白，组要以2D-Gel和质谱为主，分为top-down和bottom-up分析方法。
3、功能实验 设计功能实验，以深入了解差异表达蛋白在特定生理和病理过程中的作用。在进行这些分析的过程中，保持统计和数据分析的严谨性是关键。实验设计的合理性、样本大小、实验重复、多重比较校正、实验验证等方面都应该得到充分的考虑和处理。
4、Unlu 等提出了一种荧光差异显示双向电泳（F-2D-DIGE）的定量蛋白质组学分析方法。差异凝胶电泳（DIGE）是对2-DE 在技术上的改进，结合了多重荧光分析的方法，在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品，并第一次引入了内标的概念。
5、生物质谱技术是蛋白质组学研究中最重要的鉴定技术，其基本原理是样品分子离子化后，根据不同离子之间的荷质比（M/E）的差异来分离并确定分子量。对于经过双向电泳分离的目标蛋白质用胰蛋白酶酶解（水解Lys或Arg的-C端形成的肽键）成肽段，对这些肽段用质谱进行鉴定与分析。
6、对于蛋白质组学的研究来说，它的最基本的实验手段就是利用双向凝胶电泳（two-dimensional protein electrophoresis， 2DE），在整个 基因组水平上检测蛋白质表达的情况。双向凝胶电泳首先利用等电点聚焦来分离不同等电点的蛋白，再利用SDS-PAGE来分离不同分子量的蛋白，其分辨率是非常高的。
在向期刊投稿时，一般不需要提交原始数据和代码。但是，在审稿过程中，如果审稿编辑或者评审专家对稿件中的数据有所质疑，就会要求作者提交所有与该论文相关的原始数据和代码。此外，一些期刊也会要求作者在投稿前将原始数据和代码存储在持久且稳定的数据库中，并获得持久标识符以便其他研究人员访问。
其实大多数SCI期刊不会要求作者提供原始数据，因为这种会涉及到作者的著作权等相关事宜，很多作者为了保护自己的文章，不愿意公开文章的原始数据，所以一般情况下，作者无需提交原始数据。
为了确保研究的可靠性和可复现性。cell投稿要求原始数据的原因是为了确保研究的可靠性和可复现性，让其他学者可以更容易地复现研究结果，这种要求在科学领域尤其常见，因为科学研究的核心就是数据的真实性和可靠性。
不需要提供原始数据。在期刊的投稿指南中有说明，如果没有说明，则不需要上传原始数据，除非在审稿的过程中，审稿人要求上传原始数据用于验证文章的实际效果，才会要求原始数据。
一般不需要的，文章通过检测没有抄袭，有一定的学术价值都可以发表的。不过级别高的刊物审稿和要求都比较严，要看发什么样的刊物。不妨向公务员之家网站了解一下。期刊，定期出版的刊物。如周刊、旬刊、半月刊、月刊、季刊、半年刊、年刊等。由依法设立的期刊出版单位出版刊物。
需要，医学sci投稿要求提供原始数据，必须提供数据，还要提供数据处理过程。SCI论文对数据真实性的要求是很高的，必须如实提供原始数据、数据的处理过程，还要提供所使用处理的。有些单位使用盗版进行数据处理，这都是不能被允许的。
